哪些化学方法能把外源基因导入受体细胞? 外源基因导入受体细胞的化学方法主要有:(1)直接转化法,是指某些微生物细胞在不加任何处理的情况下就能直接摄取外源DNA。(2)化合物诱导转化法,是用二价阳离子(镁Mg2+、钙Ca2+、锰Mn2+)处理受体细胞,可以使其成为感受态细胞,即处于能摄取外源DNA分子的生理状态的细胞;外源DNA与多聚物(如聚乙二醇PEG等)和二价阳离子混合,再与受体细胞混合,可使外源DNA进入细胞。(3)接合转化法,又称3亲本接合转化法,即把供体菌、受体菌和含广泛宿主的辅助质粒的辅助菌3者共培养。(4)脂质体介导转化法,用与细胞膜成分相似的脂质体包裹外源DNA,通过脂质体与原生质体的融合或原生质体的吞噬把外源DNA导入受体细胞。(5)DNA—磷酸钙沉淀物转染法,是指有的动物细胞能捕获黏附在细胞表面的DNA—磷酸钙沉淀物,使DNA转入受体细胞。 |
|
|